尊龙凯时人生就博为您提供RIN-14B大鼠胰岛素瘤细胞的详细培养指南，以帮助科研人员在细胞培养过程中取得最佳结果。

一、细胞培养条件

细胞名称： RIN-14B大鼠胰岛素瘤细胞
生长特性： 该细胞具有贴壁生长的特性。
冻存条件： 使用无血清冻存液（货号：C7001）。
培养体系： 推荐使用1640培养基，添加10% FBS及1% 双抗。
传代方法： 第一次建议1:2的传代比例，常规的传代方法是在细胞汇合度超过80%时进行。
备注： 建议收集培养基进行过渡对比。如果对比培养效果不佳，建议直接购买我们的完整培养基。

二、细胞处理及培养步骤

收到细胞后，应尽快培养至良好状态，使用完全培养液灌满细胞瓶并封好瓶口，以确保运输细胞的最佳状态。收到细胞后，使用75%酒精消毒整个细胞瓶，并在超净台进行无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO₂的培养箱静置3-4小时，使细胞状态稳定，然后观察细胞生长情况，并拍照保存不同倍数的细胞图像（建议40x, 100x, 200x各一张）。

细胞传代步骤

a. 当细胞未超过80%汇合度时，收集培养液到离心管中，留下5ml，并放入37℃、5% CO₂培养；
b. 如果细胞超出80%的汇合度，进行传代：
1. 舒适的PBS清洗细胞，弃去培养上清；
2. 加入1-2ml的消化液，观察细胞状态，若大部分细胞变圆脱落，快速用完全培养基终止消化；
3. 吸出悬液，转移至离心管并离心；
4. 将细胞按1:2比例分瓶，并补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，培养于37℃、5% CO₂的环境中。

细胞冻存步骤

1. 当细胞生长覆盖培养瓶80%时，弃去培养液，使用PBS清洗；
2. 加入消化液，观察细胞状态后，终止消化并转移悬液至离心管；
3. 离心后加入无血清冻存液，混匀并转移至冻存管；
4. 将冻存细胞放入-80℃冰箱以备后续使用。

细胞复苏步骤

1. 从液氮取出冻存管，快速置于37℃水浴中解冻；
2. 将解冻的细胞移至含5ml培养基的离心管中，离心后重悬；
3. 接种于T25培养瓶，置于培养箱中；
4. 第二天更换新鲜培养基，继续培养细胞。

三、注意事项

在运输过程中，某些细胞可能会出现脱落现象，属正常现象。按照规定的方法进行离心和消化可以缓解该情况，确保细胞生长良好。

四、售后条款

1. 若细胞出现问题，可重发的情况包括：运输损失、培养液漏液及污染等。
2. 不予重发的情况包括客户操作失误、非推荐培养体系及未及时通知等。
注明需提供实验结果及相关照片以便判断。

尊龙凯时人生就博致力于为科研工作者提供优质的细胞培养材料与服务，以支持科学研究的持续进展。